健脾益肠散对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织HSP70表达的影响

目的:探讨健脾益肠散对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织热休克蛋白70(HSP70)蛋白和mRNA表达的影响。方法:将健康SPF级雄性SD大鼠60只,随机分为2组,正常组和造模组;造模组采用二硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法复制UC大鼠模型;待复制模型成功后将造模组随机分为5组,分别为模型组、柳氮磺吡啶组(0.3 g·kg~(-1))以及健脾益肠散高、中、低剂量组(204,136,68 g·kg~(-1)),每组10只;灌胃相应药物21 d后,观察各组大鼠的一般状态和结肠黏膜组织损伤情况,免疫组化、蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分别检测大鼠结肠组织中HSP70的蛋白和mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜损伤评分显著升高(P0.01),HSP70蛋白和mRNA表达均显著降低(P0.01)。与模型组比较,各给药组结肠黏膜损伤评分均显著降低(P0.01),各给药组均可增加结肠组织HSP70的蛋白和mRNA表达(P0.05,P0.01),其中以健脾益肠散高剂量组最为明显(P0.05,P0.01)。结论:健脾益肠散可能通过促进HSP70的表达而达到对UC大鼠结肠黏膜的免疫保护,从而发挥治疗作用。     

白头翁皂苷B4在正常大鼠和溃疡性结肠炎大鼠体内组织分布情况的比较

目的:建立大鼠体内白头翁皂苷B4的UPLC-ESI-MS/MS,比较白头翁皂苷B4在正常大鼠和溃疡性结肠炎大鼠肝、脾、肾、心、肺组织中的分布情况,为研究白头翁汤治疗溃疡性结肠炎的作用过程和机制提供参考。方法:雄性SD大鼠等分为正常组和模型组,均按5 g·kg~(-1)灌胃给药白头翁汤冻干粉,分别于15,45,120,360 min用5%水合氯醛麻醉正常大鼠和模型大鼠,取肝、脾、肾、心、肺组织,采用UPLC-ESI-MS/MS分析,以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,ACQUITY BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),柱温35℃,流速0.4 m L·min~(-1)。结果:白头翁皂苷B4在大鼠体内存在广泛分布与代谢。在正常大鼠的肝、脾、肾、心、肺组织中,白头翁皂苷B4均在120 min时达到最大质量浓度。与正常组比较,在模型组大鼠肝、心组织中白头翁皂苷B4质量浓度各时间点均明显升高(P0.05);在脾和肾组织中,分别于45 min和120 min时明显升高(P0.05);在肺组织中,于120 min时显著增加(P0.05)。结论:溃疡性结肠炎大鼠对白头翁皂苷B4的吸收和生物利用度均优于正常组,溃疡性结肠炎的病理状态可导致白头翁汤中白头翁皂苷B4的吸收增强。     

Development of a novel quantitative real‐time PCR assay with lyophilized powder reagent to detect African swine fever virus in blood samples of domestic pigs in China

African swine fever (ASF) is a devastating disease, which is causing huge economic losses in China. Therefore, it is urgent to provide a rapid, highly specific and sensitive diagnostic method for the detection of African swine fever virus (ASFV), the ASF infectious agent. In this study, a novel quantitative real‐time polymerase chain reaction (qPCR) assay with lyophilized powder reagents (LPR), targeting the major structural protein p72 gene, was established for the detection of ASFV. This assay had many advantages, such as saving time and money, good sensitivity and repeatability. The sensitivity of this assay was 100 copies/μl of ASFV plasmid templates, and the assay showed 10‐fold greater sensitivity than a qPCR assay recommended by OIE. Furthermore, specificity analysis showed that qPCR with LPR for ASFV had no cross‐reactivity with other important swine pathogens. In clinical diagnoses of 218 blood samples of domestic pigs in China, the positive rate of the diagnosis of ASFV by qPCR with the LPR and commercial kit reached 80.73% (176/218) and 76.61% (167/218) respectively. The coincidence rate between the two assays is 92.20% (201/218), and kappa value is 0.768 (p < .0001) by SPSS analysis. The overall agreement between the two assays was 95.87% (209/218). Further Pearson correlation and linear regression analysis showed a significant correlation between the two assays with an R² value of 0.9438. The entire procedure, from specimen processing to result reporting, can be completed within 2 hr. Our results demonstrated that the qPCR‐LPR assay is a good laboratory diagnostic tool for sensitive and efficient detection of ASFV.     

理气开郁法板块方镇痛作用的动态分析

目的：探讨理气开郁法中药板块方的镇痛作用特点。方法：将150只清洁级昆明种小鼠,按体重随机区组法分为15组,包括对照组,柴郁汤、芍甘汤、痛泻要方、金铃子散高中低剂量各组,吗啡和布洛芬组,采用45℃、50℃、55℃水浴引致小鼠疼痛模型,动态测定痛阈潜伏期,用药前测定基础痛阈。采用重复测量设计的方差分析。结果：柴郁汤、芍甘汤和痛泻要方的镇痛作用以高剂量更明显;柴郁汤对45℃、50℃、55℃水浴的痛阈潜伏期均有延长作用,柴郁汤高、中剂量在多个时间点上显示出较好的镇痛作用。结论：柴郁汤的镇痛作用较强,作用特点类似于中枢镇痛药或兼有中枢性镇痛作用;芍药甘草汤、痛泻药方、金铃子散属于作用于外周的镇痛药。     

升降散对脓毒症心肌损伤的保护作用

目的观察在西医常规治疗的基础上加用中药升降散治疗脓毒症心肌损伤患者的临床疗效。方法选取脓毒症心肌损伤(毒热内盛证)患者60例,随机分为西医对照组和中西医治疗组。西医对照组给予西医常规治疗,中西医治疗组在西医常规治疗基础上加用升降散。比较2组患者治疗前和治疗后第7天的中医证候积分、中医证候疗效、纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级,检测肌钙蛋白I(c Tn I)、脑钠肽(BNP)、左室射血分数(LVEF)和二尖瓣扩张早期的血流速度与心房收缩期峰值血流速度的比值(E/A)。结果治疗后,2组患者中医证候积分、血清c Tn I、BNP均有所改善(P0.05),中西医治疗组改善情况均显著优于西医对照组(P0.05)。治疗后,2组患者LVEF、E/A、NYHA分级均显著好转(P0.05)。结论升降散结合西医常规治疗能有效降低脓毒症心肌损伤(毒热内盛证)患者中医证候积分,提高中医证候疗效,减轻患者心肌损伤。     

天麻粉水浸出物抑制油酸诱导的HL-7702细胞三酰甘油蓄积的实验研究

目的：研究天麻粉水浸出物抑制油酸(OA)诱导的HL-7702细胞三酰甘油(TG)蓄积的作用及相关细胞信号通路。方法以1 mmol/L的OA诱导细胞脂肪变性,同时加入不同浓度的天麻粉水浸出物共同孵育24 h后测定细胞内TG含量。在Western blot实验中,细胞以天麻粉水浸出物做相应处理后检测AMP活化蛋白激酶α(AMPKα)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的磷酸化水平。在使用compound C的实验中,细胞以10μmol/L的compound C预处理30 min,然后加入天麻粉水浸出物,共同孵育8 h后进行Western blot实验;或加入OA+天麻粉水浸出物,共同孵育24 h后测定细胞内TG含量。结果 OA孵育24 h后,HL-7702细胞内TG含量较对照细胞升高<(4.0±0.5)倍(P<0.01),天麻粉水浸出物使细胞内TG呈剂量依赖性降低。天麻粉水浸出物处理后能剂量和时间依赖性地激活HL-7702细胞的AMPK信号通路,表现为磷酸化AMPKα(p-AMPKα)和磷酸化ACC(p-ACC)的水平显著增加。 compound C预处理并与天麻粉水浸出物共同孵育后能完全阻断后者对AMPK通路的激活作用以及减少细胞内TG的药效。结论天麻粉水浸出物能显著抑制OA诱导的HL-7702细胞三酰甘油蓄积,此作用依赖于细胞内AMPK通路的激活。     

溃疡生肌散治疗慢性皮肤溃疡的效果观察

目的：探讨溃疡生肌散治疗慢性皮肤溃疡的临床效果。方法选择2013年1月~2014年7月来本院治疗慢性皮肤溃疡的64例患者作为研究对象,随机分为两组,每组32例。对照组采用美宝湿润烧伤膏外敷,观察组采用溃疡生肌散外敷,每2天换药1次,连续治疗8周,观察和对比临床疗效、创面愈合时间及创面愈合率。结果观察组的总有效率、创面愈合率均高于对照组,创面愈合时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论溃疡生肌散治疗慢性皮肤溃疡具有很好的临床效果,值得临床推广应用。     

双歧三联活菌联合蒙脱石散治疗小儿急性腹泻疗效观察

目的：探讨双歧三联活菌联合蒙脱石散治疗急性腹泻对患儿排便次数及症状改善的影响。方法选择2012年8月至2013年8月在我院接受治疗的急性腹泻患儿132例作为研究对象。根据随机数表法将患儿分成观察组和对照组各66例。对照组患儿给予蒙脱石散治疗,观察组在此基础上采用双歧三联活菌进行治疗。比较两组患儿治疗前后的腹泻排便次数、疗效以及症状改善情况。结果观察组患儿治疗后5d的腹泻排便次数明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患儿的显效率和总有效率分别为65.15%,98.48%,均明显高于对照组的45.45%,86.36%,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患儿的腹痛消失时间、呕吐消失时间、退热时间及大便常规的正常时间均少于对照组,差异均有显著统计学意义(P<0.01)。结论双歧三联活菌与蒙脱石散联合治疗小儿急性腹泻可明显减少患儿排便次数,改善其临床症状,疗效明显,值得临床上推广应用。     

蔡光先教授运用五味异功散合过敏煎治疗小儿过敏性疾病验案举隅

蔡光先系国家级名中医,第五批全国名老中医药专家学术经验继承工作指导老师,博士研究生导师,国家有突出贡献专家,从事中医药教学、科研及临床工作40余载,擅长内科疑难杂症的诊治,临床经验丰富,学术造诣颇深,笔者有幸跟师临证学习,受益匪浅.现择其运用五味异功散合过敏煎治疗小儿过敏性疾病验案3则报道如下,以飨同道.     

不同冻干保护剂对利巴韦林冻干粉针的影响研究

目的研究Emprove低内毒素蔗糖、无水乳糖、Emprove低内毒素葡萄糖、Emprove低内毒素甘露醇、Emprove低内毒素山梨醇、Emprove低内毒素氯化钾、Emprove低内毒素甘氨酸7种不同类型常用冻干保护剂对利巴韦林冻干粉针性能的影响。方法以外观和复溶效果为指标,考察了预冻时间、冻干保护剂用量、冻干时间的影响。测定了空白粉针剂和利巴韦林粉针剂冻干后含水量、p H值和利巴韦林质量分数。结果以无水乳糖为冻干保护剂,预冻时间6 h,冻干时间9 h,保护剂用量4%;以Emprove低内毒素氯化钾为冻干保护剂,预冻时间9 h,冻干时间9 h,保护剂用量4%;以Emprove低内毒素甘露醇为冻干保护剂,预冻时间6 h,冻干时间6 h,保护剂用量4%;以Emprove低内毒素甘氨酸为冻干保护剂,预冻时间12 h,冻干时间9 h,保护剂用量4%。所得冻干粉针外观饱满、平整,迅速、完全复溶。结论无水乳糖、Emprove低内毒素氯化钾、Emprove低内毒素甘露醇、Emprove低内毒素甘氨酸4种冻干保护剂更适合制备利巴韦林冻干粉针,可为水溶性药物冻干粉针剂的制备提供了参考。